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バイオ実験プロトコル「じっけん110番」5M NaClを調製するときのコツ
エタノール沈殿やChIPアッセイの脱クロスリンクなどで使われる5M NaClですが、溶液を作るときにNaClがなかなか溶けきれなくて苦労する人も多いと思います。
というのも、NaClの飽和溶解度は室温で約36g/100g水であり、モル濃度換算すると5Mにかなり近い値となるからです。
つまり、5Mというのは、塩化ナトリウムを水に溶ける飽和状態にかなり近い濃度であり、溶媒（＝水）の量が少しでも足りないと溶けないで析出してしまうのです。
そこで、100mLの5M NaCl水溶液を作る具体的な方法を述べたいと思います。
- ビーカーとスターラーと使い、撹拌しながらNaCl 29.2gを80mL超純水に溶かす。15分もすればかなり溶ける。
- しかし、１の状態では溶けないNaClが結構残っている。
- そこで、少しずつ超純水を加えながら、残っているNaClを溶かしていく。
- NaClが溶けきったら、水溶液50mLをファルコンチューブ（遠沈管）で測り取り、それをメディウム瓶に移す。
- ビーカーに残っているNaCl水溶液を全量50mLファルコンチューブに移す。
- この時、50mLに少し足りないはずなので（もし超えていたら作成失敗なので最初からやり直し）、ファルコンチューブに超純水を加え、50mLまでメスアップする。
- メスアップした5M Nacl水溶液をファルコンチューブからメディウム瓶に加える。これで5M NaCl 100mLの出来上がり。
- 最後にオートクレーブ滅菌して常温保存。
注意点としては必要な水の量が100mLではなく、それ未満であるという点です。
29.2gのNaClを100mLの水に溶かしてしまうと、出来上がったNaCl水溶液のモル濃度は5Mよりも薄くなってしまいます（NaClが溶けることで、水溶液の体積が100mLを超えてしまう）。
なので、面倒ですが、最初は85mLくらいの、やや少なめの水でNaClを溶かし、そこから徐々に水を追加して溶けていないNaClを溶かし切ってしまうようにしてください。
ちなみに、NaClの溶解度は温度による影響が非常に少ないです。
なので、冬で気温が下がったときにNaClの溶解度が下がって一部が析出してしまう・・・ということはありませんのでご安心ください。